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固相萃取遇到的问题?

  • 发表时间2023-03-03
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   固相萃取的基本原理
  固相萃取(SPE)是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱,达到分离和和富集的目的。先使液体样品通过一装有吸附剂(固相)小柱,保留其中某些组分,再选用适当的溶剂冲洗杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱,从而达到快速分离净化与浓缩的目的。SPE可以用于所有类型样品的处理,但是液体样品是最容易处理的。
  固相萃取的分离模式
  1.反相固相萃取
  -吸附剂(固定相)是非极性或弱极性的,如硅胶键合C18,C8,C4,C2,-苯基等。流动相为极性(水溶液)或中等极性样品基质。
  -吸附剂的极性小于洗脱液的极性。
  -应用:可以从强极性的溶剂中(如水样)萃取是非极性或弱极性的化合物。
  -作用机理:非极性-非极性相互作用,如范德华力或色散力。
  有机溶剂非极性顺序:
  正己烷>环己烷>四氯化碳>甲苯>苯>无水>氯仿>二氯甲烷>四氢呋喃>乙酸乙酯>丙酮>乙腈>异丙醇>甲醇>水>乙酸
  2.正相固相萃取
  ·吸附剂:极性键合相,如硅胶键合-NH2、-CN,-Diol(二醇基);极性吸附剂,如silica florisil、(A-,N-,B-)alumina、硅藻土等。流动相为中等极性到非极性样品基质。
  ·作用机理:
  ☆极性-极性相互作用
  ☆表面硅羟基、铝羟基与极性化合物的极性官能团之间相互作用,包括氢键,π-π键等。
  ☆偶极-偶极相互作用
  ☆偶极-诱导偶极相互作用
  -应用:从非极性溶剂样品中萃取极性化合物除此之外,还有离子交换萃取和免疫亲和两种分离模式。
  固相萃取的操作步骤
  一个完整的固相萃取步骤包括固相萃取柱的预理、上样、洗去干扰物质、洗脱及收集分析物个步骤。
  1.固相萃取柱的预处理
  ·一是为了润湿和活化固相萃取填料,二是为了除去填料中可能存在的杂
  质,减少污染。
  ·采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。
  ·反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质,通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理,然后用水或缓冲溶液替换滞留在柱中的甲醇。
  ·正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质,通常用样品所在的有机溶剂来预处理。
  ·离子交换填料一般用3~5mL去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。
  ·固相萃取填料从预处理到样品加入都应保持湿润,如果在样品加人之前,萃取柱中的填料干了,需要重复预处理过程。
  2.上样
  将样品倒入活化后的SPE小柱,然后利用加压、抽真空或离心的方法使样品进入吸附剂。采取手动或泵以正压推动或负压抽吸方式,使液体样品以适当流速通过固相萃取柱,此时,样品中的目标萃取物被吸附在固相萃取柱填料上。
  3.洗去干扰物质
  ·目的是为了除去吸附在固相萃取柱上的少量基体干扰组分。
  ·一般选择中等强度的混合溶剂,尽可能除去基体中的干扰组分,又不会导致目标萃取物流失。
  ·反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶剂-水混合液,有机溶剂比例应大于样品溶液而小于洗脱剂溶液。
  4.洗脱及收集分析物
  -选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物,收集洗脱液,挥干溶剂以备后用或直接进行在线分析。-为了尽可能将分析物洗脱,使比分析物吸附更强的杂质留在SPE柱上,需要选择强度合适的洗脱溶剂。

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